氨基酸分析儀是一種用于測定食品、飼料、生物樣品等中氨基酸含量的儀器,自動進(jìn)樣器支持多樣品連續(xù)分析(如1500 μL樣品瓶),部分型號可實現(xiàn)柱前衍生自動化;檢測模塊:茚三酮衍生法為主,搭配紫外/可見光檢測器;新型儀器可能采用積分脈沖安培檢測器,提升靈敏度;數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):實時記錄色譜峰并計算濃度,支持保留時間重現(xiàn)性(CV<0.3)和峰面積精度(CV<1.0)。
氨基酸分析儀的測定步驟:
1.樣品處理:
-游離氨基酸測定:若測定樣品中各種游離氨基酸含量,需先除去脂肪雜質(zhì),然后直接上柱進(jìn)行分析。
-蛋白質(zhì)氨基酸組成測定:若測定蛋白質(zhì)的氨基酸組成,樣品必須經(jīng)酸水解,使蛋白質(zhì)變成氨基酸后,再上柱進(jìn)行分析。一般使用6mol/L的鹽酸,在110℃左右水解22-24小時,水解后需將水解液過濾、定容。
2.上柱分析:
-將處理好的樣品上柱,上柱的樣品量根據(jù)所用自動分析儀的靈敏度來確定,一般為每種氨基酸0.1μmol左右(水解樣品干重為0.3mg左右)。
3.洗脫與分離:
-開啟儀器,設(shè)定好洗脫液的流速、溫度等參數(shù),使樣品中的氨基酸在離子交換柱中進(jìn)行分離。不同的氨基酸在離子交換柱中的吸附和洗脫能力不同,從而實現(xiàn)分離。
4.衍生反應(yīng):
-氨基酸從離子交換柱中洗脫出來后,與茚三酮溶液發(fā)生顏色反應(yīng),生成紫色或黃色的化合物。
5.比色測定:
-在特定的波長下,對生成的化合物進(jìn)行比色測定。一般來說,紫色物質(zhì)在570nm波長下進(jìn)行比色測定,黃色化合物在440nm波長下進(jìn)行比色測定。
6.數(shù)據(jù)處理:
-儀器會根據(jù)比色測定的結(jié)果,自動計算出樣品中各種氨基酸的含量,并給出相應(yīng)的數(shù)據(jù)報告。
氨基酸分析儀的選擇與維護(hù)要點:
1.儀器選型:根據(jù)檢測需求選擇陽離子交換(常規(guī)分析)或陰離子交換系統(tǒng)(無需衍生),關(guān)注檢出限、通量和自動化水平。
2.日常維護(hù):定期清洗色譜柱、校準(zhǔn)檢測器,避免緩沖液沉淀堵塞流路;使用脫氣裝置防止氣泡影響分離效果。